Evidencia de respuesta inmune intratecal poliespecífica en pacientes pediátricos con procesos neuroinflamatorios / Evidence of polyspecific intrathecal immune response in pediatric patients with neuroinflammatory processes

Introducción: La síntesis intratecal de anticuerpos contra algunos virus neurotrópicos como sarampión, rubéola y virus varicela zoster en pacientes con esclerosis múltiple, con una frecuencia muy superior a la esperada, llevó a la introducción de la reacción sarampión-rubéola-varicela. La presencia de anticuerpos específicos detectados en el líquido cefalorraquídeo contra dos o más de estos virus apoyó el diagnóstico no solo de la esclerosis múltiple, sino de otras enfermedades autoinmunes que involucran al sistema nervioso central. Objetivo: Identificar la presencia de respuesta inmune intratecal poliespecífica en pacientes pediátricos con proceso neuroinflamatorio independiente del agente biológico involucrado. Presentación de caso: Se estudiaron ocho niños a los cuales, mediante inmunodifusión radial simple y por ensayo inmunoenzimático, se les cuantificaron las concentraciones de inmunoglobulina G y albúmina en suero, y líquido cefalorraquídeo, lo que permitió determinar la síntesis intratecal de inmunoglobulinas. Por métodos inmunoenzimáticos se cuantificaron las concentraciones de IgG específica contra los virus estudiados en suero y líquido cefalorraquídeo, con lo cual se determinó el índice de anticuerpo específico. La reacción sarampión-rubéola-varicela fue positiva en cinco pacientes y los valores medios de este índice se encontraron por encima de 1,5 para citomegalovirus y virus herpes simple. Conclusiones: Se identificaron repuestas neuroinmune antiviral poliespecífica en pacientes pediátricos con proceso neuroinflamatorio(AU)

Introduction: The intrathecal synthesis of antibodies against some neurotropic viruses such as measles, rubella and varicella zoster virus in patients with multiple sclerosis, with a frequency much higher than expected, led to the introduction of the measles-rubella-varicella reaction. The presence of specific antibodies detected in cerebrospinal fluid against two or more of these viruses supported the diagnosis not only of multiple sclerosis, but also of other autoimmune diseases involving the central nervous system. Objective: To identify the presence of polyspecific intrathecal immune response in pediatric patients with neuroinflammatory process independent of the biological agent involved. Case presentation: Eight children were studied and their serum and cerebrospinal fluid immunoglobulin G and albumin concentrations were quantified by simple radial immunodiffusion and enzyme-linked immunosorbent assay to determine intrathecal immunoglobulin synthesis. The concentrations of specific IgG against the viruses studied in serum and cerebrospinal fluid were quantified by enzyme-linked immunosorbent assay methods, thus determining the specific antibody index. The measles-rubella-varicella reaction was positive in five patients and the mean values of this index were found to be above 1.5 for cytomegalovirus and herpes simplex virus. Conclusions: Polyspecific antiviral neuroimmune antiviral responses were identified in pediatric patients with neuroinflammatory process(AU)

Caracterización de los derrames pleurales y ascíticos mediante la concentración de proteínas, comparación con los criterios actuales / Characterization of pleural and ascites effusions using concentration of their proteins and their comparison with current criteria

Introducción: Los líquidos serosos se clasifican tradicionalmente en exudados/trasudados según la concentración de proteínas y otros criterios que presentan un gran margen de error. Posteriormente se ensayan criterios por separado: en 1972 Light y otros para los líquidos pleurales y en 1992 el criterio de Runyon para los líquidos ascíticos, con sensibilidades respectivas del 98 % y 97 %. Hoy se sigue aplicando el criterio primario con un error hasta del 40 %. Objetivo: Identificar el margen de error en la clasificación de los líquidos pleurales y ascíticos cuando se emplea el criterio clásico (Starling), respecto a los criterios actuales de Light y Runyon utilizando reactivos de producción nacional. Métodos: Se estudiaron 185 muestras de líquidos (121 pleurales y 64 ascíticos) en el periodo de los años 2017-2022 en el Hospital Clínico Quirúrgico Docente Miguel Enríquez de La Habana. Resultados: Se encontraron discordancias en la clasificación de exudados/trasudados de los líquidos empleando los diferentes métodos de diferenciación, importantes en la clínica. Empleando el criterio clásico de las proteínas de Starling, el 9,1 % y el 17,2 % de los derrames pleurales y ascíticos, respectivamente, tuvo errores en su clasificación como exudado o trasudado. Conclusión: El margen de error en la clasificación de los líquidos pleurales y ascíticos osciló entre un 9-17 % cuando se emplea el criterio clásico de las proteínas (Starling), respecto a los criterios actuales de Light y Runyon.

Introduction: Serous fluids are classified as exudates/ transudates based on protein concentration and other criteria that have a large margin of error. Subsequently, criteria were tested separately for pleural fluids in 1972 by Light et al and for ascitic fluids in 1992 the Runyon criteria with respective sensitivities of 98 % for the first and 97 % for the second. Currently, the primary criterion continues to be applied with an error of up to 40 %. Objective: To identify the margin of error in the classification of pleural and ascitic fluids when using the classical criteria (Starling) with respect to the current criteria of Light and Runyon using nationally produced reagents. Methods: 185 fluid samples were studied - 121 pleural and 64 ascitic - in the period 2017/2022 at the Miguel Enriquez Clinical Surgical Teaching Hospital in Havana. Results: Discordances were found in the classification of exudates / transudates of liquids using the different differentiation methods, important in the clinical diagnosis, concluding that using the classic criterion of Starling proteins, 9,1 % and 17,2 % of the pleural and ascitic effusions had errors in their classification as exudate and/or transudate. Conclusion: The margin of error in the classification of pleural and ascitic fluids ranged from 9-17% when the classical criteria of proteins (Starling) is used with respect to the current criteria of Light and Runyon.

Estancias post-Quincke, nueva posibilidad de formación, aprendizaje, producción e intercambio de conocimientos científicos / Post-Quincke stays, new possibility of training, learning, production and exchange of scientific knowledge

RESUMEN Introducción: Como resultado de las Becas de Investigación Quincke, se ha formado un grupo de investigación con jóvenes estudiantes de medicina y recién egresados interesados en continuar las investigaciones que se desarrollan en el Laboratorio Central de Líquido Cefalorraquídeo (LABCEL). Objetivo: Describir el crecimiento de este grupo entre los años 2012 al 2020en lo que se ha llamado estancias post-Quincke integrado por los 8 alumnos ayudantes de LABCEL y los 8 alumnos que no forman parte de este colectivo y que a lo largo de estos años se han incorporados como alumnos asociados. Resultados: Desde el punto de vista métrico el promedio de artículos de los alumnos ayudantes ha sido de 28,23 y de los asociados de 47,5. El índice h sin embargo de los alumnos ayudantes promedio es de 4,12 en comparación con el de los asociados de 3,75. El promedio de años que los alumnos ayudantes se han vinculado ha sido de 5 años y el de los asociados de 3,75. Ambos grupos han trabajado colectivamente para cursos y eventos tanto en Cuba como en el exterior. Conclusiones: Las estancias post-Quincke han demostrado ser una nueva posibilidad de formación, captación de talentos, aprendizaje, producción científica e intercambio de conocimientos científicos en una novedosa forma pedagógica de hacer ciencia.

ABSTRACT Introduction: As a result of the Quincke Research Scholarship, are search group with young medical students and recent graduated physicians interested to continue their search eve loping in LABCEL was integrated. Objective: To describe the growth of this group from 2012to 2020 in the post Quincke stay integrated by 8 assistant students and 8 students don't belong to LABCEL but integrated as associated students. Results: From the metric point of view the mean articles made by the assistant students was 28,23 and from the associated one, 57,5. Nevertheless the mean of h index from the assistant students was 4,12 in comparison with the associated students that was 3,75. The average of years pent for the assistant students was 5 years and for the associated was 3,75. Both groups were working together in courses and congress in Cuba and abroad. Conclusions: The post Quincke stay was demonstrated to be a new possibility for formation, talent capture, learning. Scientific production and exchange of scientific knowedges in a new pedagogic way to make science.

Becas de Investigación Quincke, un espacio donde el alumno se inicia como científico / Quincke Research Scholarship, an space where the student start to be a scientist

Introducción: Las Becas de Investigación Quincke son una iniciativa que se sustenta en la necesidad de la adquisición de habilidades para la investigación, lo que no está contemplado en la malla curricular de los estudiantes de Medicina en Cuba. Objetivo: Describir los aspectos más novedosos en cuanto a innovación de las becas Quincke, que se ha mantenido sostenidamente y en ascenso todos estos años para capacitar a los estudiantes como futuros científicos. Métodos: Este estudio es una investigación cualitativa. Se usa como instrumento de investigación la entrevista y los grupos focales y, además, se evalúa la evidencia documental disponible. Resultados: Hasta la fecha han asistido 101 estudiantes de Medicina y 24 médicos residentes de Angola, Bolivia, China, Colombia, Cuba, España, Estados Unidos, México, Uruguay y Vietnam. Han participado profesores de España, Ecuador y Perú a impartir gratuitamente sus conocimientos. A partir de datos originales no publicados, basándose en los principios de la ciencia abierta, los estudiantes deben llegar a los resultados a partir de una hipótesis. Para los estudiantes que provienen del exterior se ha posibilitado que soliciten travel grants gracias a un donativo de la American Physiological Society a partir del International Opportunity Program Award. Conclusiones: Las Becas de Investigación Quincke han demostrado ser un proyecto innovador sostenible basado en la ciencia abierta para la educación médica por la forma en que se desarrolla, donde los estudiantes son protagonistas de los resultados científicos. Es, además, un proyecto movilizador de personalidades procedentes de otros países(AU)

Introduction: Quincke Research Scholarship is an iniciative that was supported by the necessity to develop research abilities for the medicine students that was not included in the curricular net in Cuba Objective: To describe the most new aspects of the Quincke Scholarship to develop the starting of the students like future scientists Methods: This study is a qualitative research. Interviews, phocal groups and available documental study were employed. Resultads: 101 medicine students and 24 residents from Cuba, USA, China, Vietnam, Uruguay, Bolivia, Spain, Mexico, Colombia and Angola among other ones were participated. In addition, professors from Spain, Ecuador and Peru came for free to share their knowledges. Based on open science non-published original data was brought to the students in order to arrive to results from an hypothesis. For foreigner students they can apply to a travel grant thanks to the American Physiological Society by an International Opportunity Program Award. Conclusions: Quincke Research Scholarship was demonstrated to be an innovative and sustaintable project based on open science for medical education because by the way the students become protagonists of scientific results and to movilize personalities from other countries Quincke(AU)

Síntesis intratecal de IgG anti-herpes virus como evidencia neuroinmunológica en pacientes pediátricos / Intrathecal synthesis of IgG against herpes virus as neuroimmunological evidence in pediatric patients

En los procesos neuroinflamatorios se produce a nivel de líquido cefalorraquídeo una activación policlonal y poliespecífica. Esta activación se produce desde los primeros días y puede permanecer por períodos prolongados. Luego por mecanismos de apoptosis los clones que no responden directamente contra los agentes biológicos involucrados no proliferan. El Reibergrama permite saber si las inmunoglobulinas presentes en el líquido cefalorraquídeo se sintetizaron o no en el sistema nervioso central (SNC) y el Índice de Anticuerpo (IA) determina la especificidad de las mismas en caso de que exista síntesis intratecal. Con estas herramientas nos propusimos identificar la respuesta neuroinmunológica frente a agentes de la familia herpesvirus en pacientes pediátricos con proceso inflamatorio del SNC a partir de sus respectivos IA. Para lograr esto se cuantificaron los niveles de IgG y albúmina en suero y líquido cefalorraquídeo (LCR) mediante inmunodifusión radial simple y por ensayo inmunoenzimático, con lo cual se construyó el Reibergrama que permitió la selección de 85 pacientes pediátricos con síntesis intratecal de inmunoglobulinas, que se diferenciaron en cuatro grupos según sus edades. Mediante ensayo inmunoenzimático se cuantificaron los niveles de IgG específica contra citomegalovirus, virus varicela zoster y virus herpes simple, tanto en suero como en LCR y se determinó el IA específico. La respuesta contra los virus estudiados fue similar para los distintos grupos de edades, lo cual nos permite afirmar la exposición temprana a los mismos(AU)

In a neuroinflammatory process a polyclonal and poly-specific activation is produced in cerebrospinal fluid. This activation starts from the first days and may persist for a long time. The clones not related directly against the biological agent do not proliferate by apoptosis. Reibergram determine if part of the immunoglobulins content in cerebrospinal fluid belongs from the blood or it is synthesized in the central nervous system. Antibody index determines if the specific antibodies was synthesized intrathecally. By these tools it can be possible to identify the humoral immune response against some herpes virus in pediatric patients suffering from a central nervous system inflammatory process. Quantification of specific IgG against citomegalovirus, varicella zoster and herpes simplex virus in serum and cerebrospinal fluid was done by ELISA. Specific Antibody index against these viruses were similar for the different age groups, which confirm the early exposure of the population(AU)

Neuroimmunological approach for evaluation of viral measles, mumps and rubella (MMR) triple vaccine

Introduction: During the neuroinflammatory processes there are a poly-specific and polyclonal activation in the cerebrospinal fluid. It means that there can be quantified antibodies against all the components of the vaccines may have received. Objective: To evaluate the immune response against measles, mumps and rubella in vaccinated pediatric patients. Methods: All the serum and cerebrospinal fluid (CSF) paired samples from pediatric patients with neurological symptoms, that were submitted to hospitals from Havana City and were performed a lumbar puncture, were collected. Serum and CSF IgG, albumin were measured by immune-diffusion techniques using NOR and LC Partigen Immunoplates (Siemens, Marburg) and specific antibodies against measles, mumps and rubella were quantified by ELISA kits (Enzygnost, Siemens, Marburg). Reibergrams were employed in order to determine if there was IgG intrathecal synthesis. Later on, antibody index against the specific virus were calculated. Results: In all the neuroimmune inflammation process were found antibody index against measles, mumps and rubella in a different ample confidence variation among the different virus. Antibodies against mumps are significantly different from the other ones. It could be due to a natural different immune response or due to a deficient vaccine quality lot. Also it was possible to identify six pediatric patients that had no immune antibody index at all. It coincides with a transient hypogammaglobulinemia of infancy in such patients. Conclusions: This neuroimmunological approach can be used to evaluate the immune status in pediatric population.

Introducción: Durante los procesos neuroinflamatorios se produce una activación poliespecífica y policlonal en el líquido cefalorraquídeo. Eso significa que pueden existir anticuerpos cuantificados contra todos los componentes de las vacunas que se reciban. Objetivo: Evaluar la respuesta inmune contra el sarampión, las paperas y la rubéola en pacientes pediátricos vacunados. Métodos: Se recogieron muestras pareadas de suero y líquido cefalorraquídeo (LCR) de pacientes pediátricos con síntomas neurológicos mediante punciones lumbares realizadas en hospitales de Ciudad de La Habana. El IgG y la albúmina del suero y el LCR fueron medidos con técnicas de inmunodifusión usando inmunoplacas Partigen NOR y LC (Siemens, Marburgo). Los anticuerpos específicos contra el sarampión, la parotiditis y la rubéola se cuantificaron con dispositivos para ELISA (Enzygnost, Siemens, Marburgo). Se utilizaron reibergramas para determinar la presencia de síntesis intratecal de IgG. Seguidamente se calculó el índice de anticuerpos contra el virus específico. Resultados: En todos los procesos de inflamación neuroinmune se encontraron índices de anticuerpos contra el sarampión, la parotiditis y la rubéola con una variación amplia y diferente entre los distintos virus. Los anticuerpos contra la parotiditis son significativamente diferentes a los demás, lo que puede deberse a una respuesta inmune natural distinta o a una deficiente calidad de las vacunas. También fue posible identificar a seis pacientes pediátricos en los que no se observó ningún índice de anticuerpos inmunes, en coincidencia con la presencia de hipogammaglobulinemia transitoria infantil en esos pacientes. Conclusiones: El enfoque neuroinmunológico que se describe puede usarse para evaluar el estado inmunológico de la población pediátrica.

Antibody Index in neuroimmunoepidemiological studies

The evaluation of the neuroimmunoepidemiological response from the reibergram allows the determination of the specific antibody index for a determined etiological agent. This evaluation has served to know the behavior of the neuroimmune response in pediatric patients to different herpesviruses, evaluate the effectiveness of vaccination campaigns and find a response that helps in the diagnosis of various processes that affect this system(AU)